血浆一氧化氮水平与牙周炎相关性的研究
【摘要】 目的 研究慢性牙周炎和牙周健康者血浆一氧化氮(NO)的水平差异,以及NO水平与牙周炎症的相关性。方法 选择慢性牙周炎患者22人作为实验组,牙周健康者40人作为对照组。分别采集清晨空腹静脉血，分离血浆样本,采用硝酸还原酶法测定其中NO水平。结果 牙周健康者和慢性牙周炎患者血浆NO含量分别为(86.65±40.45)μmol/L和(145±48.9)μmol/L,二者差异具有统计学意义(P<0.01),慢性牙周炎患者血浆NO水平明显升高，经基础治疗后NO含量显著下降。血浆NO水平与牙周炎症程度具有正相关关系(P<0.01)。结论 慢性牙周炎患者血浆NO水平显著高于牙周健康者,并与牙周炎严重程度相关。
【关键词】 血浆一氧化氮 牙周炎 相关性
一氧化氮(NO)是一个具有多功能的重要细胞内信使①,血管内皮细胞是体内合成NO最主要的细胞。NO是一重要的血管活性因子, 使血管舒张并维持血管张力。对于NO在牙周病发病过程中的研究，学者们进行了一些相关的研究。
1 材料与方法
1.1 研究对象 为2007年6月—2008年3月来我院体检和门诊就诊者。正常对照40例,为健康者,均无牙周、粘膜等方面的疾病,男23例,女17例,年龄25～53岁。慢性牙周炎患者22例,男14例,女8例,年龄19～56岁。所有研究对象均知情同意并符合:①全身健康、无系统性疾病;②3个月内未服用抗生素及非甾体类抗炎药物;③6个月内未行牙周治疗;④女性未妊娠;⑤无吸烟嗜好。正常对照组与牙周炎组的年龄均无显著性差异( P>0.05)。
1.2 标本的采集及处理 实验组与对照组均于清晨空腹采肘静脉血2ml,置于含10%EDTA二钠30μl 和抑肽酶40μl的试管中, 混匀,离心(4℃, 3000rpm,10min),分离血浆,放20℃冰箱保存。测定前使样本置于室温中复融, 再次4℃,3000rpm离心5min, 取上清液测定。实验组经严格的基础治疗，包括龈上洁治术和龈下刮治及根面平整术，治疗后再次按上述方法测定血浆NO水平。
1.3 测定方法 按NO试剂盒(南京建成生物工程研究所)说明，用硝酸还原酶法检测血浆样本中NO水平,每样本均设复管,空白对照为100μL双蒸水。各样本分别于721型分光光度计、550nm波长、0.5cm光径比色测定光密度,根据试剂盒提供公式计算血浆样本中NO浓度,单位为μmol/L。
1.4 统计学处理 实验数据以SPSS11.5统计软件进行分析，实验组与对照组比较采用单因素方差分析，治疗前后比较采用重复测量数据的方差分析，P<0.05为有统计学意义。
2 结果
2.1 实验组与对照组血浆NO水平的比较 我们经实验测定血浆NO水平在牙周炎时显著高于正常人, 慢性牙周炎患者血浆NO的含量与牙周健康者血浆NO的含量相比较,差异具有统计学意义(P<0.01),慢性牙周炎患者血浆NO的含量显著升高。慢性牙周炎患者与牙周健康者血浆NO水平比较
2.2 实验组牙周基础治疗前后血浆NO水平的比较 22例慢性牙周炎患者经严格的牙周基础治疗，治疗后血浆NO水平明显下降。血浆NO水平与治疗前相比较，差异具有统计学意义(P<0.01)。 实验组基础治疗前后血浆NO水平比较。
3 讨论
体内的NO是由L精氨酸(LArg) 在一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS) 的催化下生成L瓜氨酸时释放的。由于NO是一种含不成对电子的气体, 具有自由基结构, 生物半衰期极短仅3～5秒, 很快会被氧化为NO2- 和NO3- , 所以检测组织或体液内的NO含量, 可以通过测定NO的代谢终末产物NO2-和NO3-含量间接得知。
有报道已经证实NO对维持口腔内正常菌群的平衡以及抗微生物感染有直接的影响。同时,适量的NO对牙周组织的健康及功能的正常发挥起着重要的作用。对NO与牙周病的关系,不同学者采用了不同的方法进行研究。张昕、陈世璋等应用免疫组化定量分析发现牙周病患者牙龈组织中NOS含量比正常牙龈组织中高②。陈桂珍等通过检测牙周炎患者唾液NO的含量,发现牙龈炎和牙周炎患者唾液NO的含量显著高于健康人,且牙周炎患者明显高于牙龈炎患者③。龚斌、徐立平等研究发现正常状况下与牙龈炎症状态下牙龈组织内NO含量有显著性差异,牙龈组织NO含量则与牙龈指数呈显著负相关④.已有研究发现牙周治疗前后⑤⑥，收集慢性牙周炎患者的牙龈组织，观察诱导型一氧化氮合酶的表达，牙周治疗前有大量炎症细胞浸润的标本中，诱导型一氧化氮合酶的表达明显增加，而治疗后则下降。
NO是由内皮细胞及某些神经细胞释放的体内主要的舒张血管物质。内源性NO可直接导致血管扩张并可调节血流和血压,还可抑制血小板在内皮细胞表面黏附及血小板聚集作用。在牙周炎症状态下，血浆ET的含量显著增高，而NO的水平也相应增高，来对抗ET所造成的牙周组织小血管及微血管的强烈收缩，属于一种防御反应。在这个防御反应的过程中，过量产生的NO会引起牙周组织破坏，并参与牙周病的发病，间接地造成了牙周组织的损伤，具体的损伤机制尚需进一步研究。
我们通过检测血浆NO水平来观察血浆NO水平与牙周炎的关系，这种方法采集标本简单，检测结果准确可靠。我们的结果显示慢性牙周炎患者血浆NO水平显著高于牙周健康者;慢性牙周炎患者经严格的牙周基础治疗后，血浆NO水平明显下降，其差别具有统计学意义。我们的结论也证实了慢性牙周炎患者其血浆NO水平显著高于牙周健康者，与先前的研究牙龈组织及唾液的NO含量变化相一致。
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